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大擬片形吸蟲PCR檢測試劑盒廠家上海聯祖生物相關產品:HbH檢測試劑盒 鈣調素(CAM)ELISA試劑盒 降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒化矢素;Cyanidin Chlo康普瑞汀;Combretastatin
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產品名稱 | 大擬片形吸蟲PCR檢測試劑盒廠家 |
英文名稱 | Fasciola magnaPCR |
貨號 | LZP6742 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa試劑盒Anti-GPR62 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學
小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa試劑盒Anti-GPR52 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 細胞周期蛋白
小鼠多萜長醇二磷酸寡糖蛋白環糊精糖基轉移酶(DDOST/OST-48)elisa試劑盒Anti-GPR68 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化 細胞骨架
兔p53(p53)elisa試劑盒Anti-GPR50 Antibody研究領域 腫瘤 神經生物學 信號轉導 細胞周期蛋白 細胞分化
山羊骨保護素(OPG)elisa試劑盒Anti-GPR85 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化
人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)elisa試劑盒Anti-GPR75 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 細胞周期蛋白 細菌及 細胞分化 細胞骨架
人鈣離子通道抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-GPR87 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化
人帶3蛋白(Band3)elisa試劑盒Anti-GPR82 Antibody研究領域 細胞生物 發育生物學 神經生物學 信號轉導 細胞周期蛋白 細胞分化 表觀遺傳學
犬白介素1α(IL1A)elisa試劑盒Anti-GPR87 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學
牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgA)elisa試劑盒Anti-GPRC5A Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 神經生物學 細菌及
牛雄烯二酮(ASD)elisa試劑盒Anti-GPRC5C Antibody研究領域 細胞生物 染色質和核信號 表觀遺傳學
雞甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)elisa試劑盒Anti-GPRC5D Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 表觀遺傳學
大鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒Anti-GPRASP1 Antibody性 狀 Lyophilized or Liquid
大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa試劑盒Anti-GPRC5B Antibody性 狀 Lyophilized or Liquid
大鼠Ⅰ型前膠原(PCⅠ)elisa試劑盒Anti-GPRC5D Antibody研究領域 免疫學 細菌及
吲哚-2-羧酸甲酯
4-苯氧基
五二磺酰化物
(3-丙羧基)三苯基溴化膦
Azetidine hydrochloride 氮雜環丁烷鹽酸鹽 36520-39-5
Methyl dimethoxyacetate 二甲氧基乙酸甲酯 89-91-8
粉
2-Bromoethyl acetate 2-溴乙基乙酸酯 927-68-4
大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA試劑盒 ,英文名: ELA2 ELISA Kit
Mouse soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒
MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISAKit人溶酶體相關膜蛋白2規格:48T/96T
維生素B1比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitDes大鼠結蛋白規格:48T/96T
大擬片形吸蟲PCR檢測試劑盒廠家鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒英文名稱:Duck Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit進口/分裝
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒英文名稱:Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit 進口/分裝
鴨環磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒英文名稱:Duck cyclic adesine mophosphate,cAMP ELISA Kit 進口/原裝
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒英文名稱:Duck anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 ELISA Kit 進口/分裝
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒英文名稱:Duck Immuglobulin E,IgE ELISA Kit*
鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒 英文名稱:Duck major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit *
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒英文名稱:Duck carbonic anhydrase,CA ELISA Kit *
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。