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弗萊克索病毒PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:SDPR檢測試劑盒胰蛋白酶檢測試劑盒一氧化碳血紅蛋白檢測試劑盒
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產品名稱 | 弗萊克索病毒PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Flexal Virus(FLEV)RTPCR |
貨號 | LZP6752 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒Anti-HNRCL Antibody研究領域 細胞凋亡
兔CD8分子(CD8)elisa試劑盒Anti-hnRNP K Antibody研究領域 藥物及化合物
豚鼠白介素5(IL-5)elisa試劑盒Anti-HMGXB3 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 神經生物學 信號轉導 轉錄調節因子 細胞膜受體 G蛋白偶聯受體 G蛋白信號
人睫狀神經營養因子(CNTF)elisa試劑盒Anti-hnRNP K Antibody研究領域 心血管 信號轉導 通道蛋白
人高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)elisa試劑盒Anti-HNRNPA0 pAb研究領域 細胞生物 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 表觀遺傳學
綿羊饑餓激素(GHRL)elisa試劑盒Anti-hnRNP L Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 細胞類型標志物
綿羊白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒Anti-HNRNPD Antibody研究領域 細胞生物 信號轉導 干細胞 轉錄調節因子 細胞外基質
馬C反應蛋白(CRP/PTX1)elisa試劑盒Anti-HNRNPC Antibody研究領域 細胞生物 信號轉導 轉錄調節因子 線粒體
雞過氧化物酶體增殖因子活化受體B(PPAR-B)elisa試劑盒Anti-HNRNPD Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 細胞凋亡
大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)elisa試劑盒Anti-HNRNPD(AUF1) pAb研究領域 腫瘤 免疫學 染色質和核信號 信號轉導 轉錄調節因子
大鼠環磷酸腺苷(cAMP)elisa試劑盒Anti-HNRNPM Antibody研究領域 神經生物學 通道蛋白
大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)elisa試劑盒Anti-HNRNPH1 Antibody研究領域 腫瘤 免疫學 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 合成與降解
猴催乳素(PRL/LTH)elisa試劑盒Anti-HNRNPH2 Antibody產品類型 一抗 藥物與化合物抗體
倉鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒Anti-HNRNPLL Antibody研究領域 心血管 細胞生物 免疫學 t-淋巴細胞 b-淋巴細胞
駱駝過氧化氫酶elisa試劑盒Anti-HORMAD1 Antibody研究領域 細胞生物 神經生物學 細胞凋亡
5-溴-2-甲氧基-3-硝基砒啶
庚酸丙酯
3-溴芐胺
2,3-二-
N,N,N',N'-Tetramethylamidinium hexafluorophosphate N,N,N',N'-四甲基甲脒六磷酸鹽 94790-35-9
METHYL (PHENYLTHIO)ACETATE 苯基硫代乙酸甲酯 17277-58-6
METHYL THIOSALICYLATE 硫代楊酸甲酯 1092846
5-Fluorocytidine 5-胞嘧啶核苷 2341-22-2
大鼠中性粒細胞趨化因子1(CINC-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管內皮細胞生長因子E(VEGF-E)免疫試劑盒 Human vascular endothelial cell growth factor E,VEGF-E ELISA Kit
人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 ,英文名: AMA ELISA Kit
RatIerleukin5,IL-5ELISA試劑盒大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISA試劑盒人谷胱甘肽硫轉移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
弗萊克索病毒PCR檢測試劑盒規格豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit*
豬傳染性胃腸炎病毒抗體(TGEV)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Transmissible Gastroenteritis virus antibody,TGEV ELISA Kit進口/原裝
豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Estradiol,E2 ELISA Kit*
豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Estradiol receptor,ER ELISA Kit*
豬促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit進口/分裝
豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit進口/原裝
豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit進口/分裝
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。