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亨德拉病毒PCR檢測試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

亨德拉病毒PCR檢測試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
BLI檢測試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T
人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T

更新時間:2021-03-14
訪問次數(shù):476
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注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產(chǎn)品名稱

 亨德拉病毒PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Hendra VirusRTPCR

 貨號

 LZP6830

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
脫氫乙酸使用說明書Anti-PHF1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學 信號轉(zhuǎn)導 通道蛋白

蘋果酸鈉保存Anti-PHF3 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學 干細胞

3,7,12-三氧-5β-膽烷酸使用說明書Anti-PGLS Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學

Southern 級真菌 DNAout10 次多少錢Anti-PHAX Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學 通道蛋白

柱式昆蟲 mtDNAout,測序級10 次哪里有賣Anti-PHF3 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學

Southern 級細菌 (G+)DNAout10 次說明書Anti-PHKB Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

分子生物學級糖原溶液,10mg/mL1mL品牌Anti-PHKA1 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 通道蛋白 細胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號

低載量 PCR 片段純化試劑盒50 次說明書Anti-PHKG1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞分化 淋巴細胞 新陳代謝

低載量 PCR 片段純化試劑盒100 次多少錢Anti-PHLDA1 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學 發(fā)育生物學

高載量 PCR 片段純化試劑盒100 次哪里有賣Anti-PHLPP1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

4mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個品牌Anti-Phospho AATF (Ser477) Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡 細胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學

SSPE 溶液 ,20×100mL多少錢Anti-Phospho ABL1 (Tyr393/439) Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導

暗盒 5×7 英寸 )1個哪里有賣Anti-Phospho ACO1 (Ser711) Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 細胞周期蛋白 表觀遺傳學

PCR 優(yōu)化試劑盒1套品牌Anti-Phospho AKT1 (Thr342) Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶

可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書Anti-Phospho ALOX5 (Ser523) Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 激酶和磷酸酶

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2Anti-CR   大黃素-8-O-β-D-

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2Anti-C-reactive protin CRP  大黃素甲-8-O-β

高鹽察氏培養(yǎng)基Anti-C-CRP  基苯酞

磷酸鹽緩沖液pH7.2Anti-CREB-1  對羥基安息香

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2Anti-P-CREB-1  DL-丁香樹脂酚

無菌磷酸鹽緩沖液pH7.2Anti-CRF   大果桉B

營養(yǎng)瓊脂NAanti-CSP   獨活素

無菌采樣袋/均質(zhì)袋Anti-CT   東莨菪苷

無菌生理鹽Anti-CT DNA   當歸酰異五味子素

無菌生理鹽Anti-CTGF   丁香酚
亨德拉病毒PCR檢測試劑盒廠家3,5-Dibromo-4-hydroxybenzaldehyde,98%通用試劑 5G

L-Carvone,99%通用試劑 25G

Ethyl vanillin,≥98%通用試劑 25G

trans-2-Hexen-1-al,98%通用試劑 25ML

2,6-Dimethyl-5-heptenal,97%通用試劑 25ML

trans,trans-2,4-nadienal,≥89%通用試劑 5ML

Cuminaldehyde,98%通用試劑 25G

Ethyl 3-methyl-3-phenylglycidate,≥98%通用試劑 25ML

Benzaldehyde propylene glycol acetal,...通用試劑 100ML

(±)-Citronellal,≥95.0%通用試劑 25ML

2-(4-tert-Butylbenzyl)propionaldehyde,...通用試劑 25ML

Hydroxycitronellal,≥95%通用試劑 5ML

gamma-nalactone,≥98%通用試劑 100ML

α-Hexylcinnamaldehyde,≥95%通用試劑 25ML

α-Amylcinnamaldehyde,97%通用試劑 100ML
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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