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黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:BV檢測試劑盒 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用
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產品名稱 | 黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Prevotella melaninogenicaPCR |
貨號 | LZP7181 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
1-nalN,N'-羰基二咪唑 99%8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽 CP,95.0%
2-nallN,N'-琥珀酰亞胺基碳酸酯 98%8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽 80%
1-Octadecal1,2-二甲基咪唑 99%聚氧乙烯 average Mv 100,000, powder
1-Hexadecal4,5-二基咪唑 98%聚氧乙烯 average Mv ~300,000, powder
1-Pentadecal咪唑 99.5%,用于緩沖溶液聚氧乙烯 average Mv ~600,000, powder
Tetradecal咪唑 99.5%,用于熒光分析聚氧乙烯 average Mv ~900,000, powder
Cyclohexal咪唑 99.5%,分子生物學級聚氧乙烯 average Mv ~1,000,000, powder
2,5-Dimethylcyclohexal咪唑 99%聚氧乙烯 average Mv ~2,000,000, powder
3,5-Dimethyl-3-hexal1-甲基咪唑 99%聚氧乙烯 average Mv ~4,000,000, powder
3-Methylcyclohexal1,1-硫代羰基二咪唑 95%聚氧乙烯 average Mv ~5,000,000, powder
Farnesol1,1-硫代羰基二咪唑 90%聚氧乙烯 average Mv ~7,000,000, powder
1-Heptal2,6-二硝苯 98%1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亞胺鹽酸鹽 98.5%
n-Octal2,6-二硝苯 分析標準品, 用于環境分析1-羥基-苯并-三氮唑(無) 99%
Terpineol2,4-二硝苯 CPL-叔亮氨酸 99%
THFA3-氨基吡唑 98%2-羥基-4-正辛氧基二苯甲酮 99%
Cyclopental4-(氯甲基)苯甲酰氯 98%抗氧劑1076 98%
西他塞坦鈉/司他生坦鈉4F2hc/CD98 (D6O3P) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgM
西他塞坦鈉/司他生坦鈉AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗羊IgM
西他塞坦鈉/司他生坦鈉IL-17F (D3M4D) Rabbit mAb (Mouse Specific)Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗羊IgM
輪環藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸BAP1 (D1W9B) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗羊IgM
拉米夫定Methyl-NF-κB p65 (Lys310) AntibodyRabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗羊IgM
拉米夫定(標準品)Golgin-97 (D8P2K) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/PE PE標記的兔抗羊IgM
鹽酸三氟拉DC-SIGN (D7F5C) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗羊IgM
鹽酸三氟拉(標準品)SOD2 (D9V9C) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/Gold 膠體金標記的兔抗羊IgM
皮質甾酮/腎上腺酮Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)Rabbit Anti-Goat IgM/FITC FITC標記的兔抗羊IgM
皮質甾酮(標準品)Syk (D3Z1E) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗羊IgM
黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價格人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT250克
人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
人胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:10克
人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT500毫升
人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1克
人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃1克
人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。