Product Center
雞類圓線蟲PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:ANA檢測試劑盒 試劑Buffer AL若低溫保存,易產生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
產品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產品名稱 | 雞類圓線蟲PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Strongyloides aviumPCR |
貨號 | LZP7348 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
1-Indanamine碳酸二乙酯 高純級衣康酸 AR,99.8%
1-Indane碳酸二酯 99.9%曲酸 99%
1-Octane,1-[4-[2-(acetyloxy)ethyl]phenyl]碳酸二甲酯(DMC) 98%乙基環己烷 99%
1-Oxo-4-hydroxy-2-en-4-ethylcyclohexa-5,8-olide碳酸二甲酯(DMC) 99%甲基環己烷 99%
1-Phenyloctane碳酸乙烯酯 98.0%氟化,二 CP
Sorbic acid, 1-p-tolylhydrazide碳酸乙烯酯 99%氟化,無 AR,粉末
2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phexy]ethyl bromide碳酸甲乙酯 98%氟化,無 GR,粉末
2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phexy]ethyl methanesulfonate碳酸烯酯 99%鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μm
2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine hydrochloride戊二酸二乙酯 99%硝酸銀 99.99% metals basis
2-Acetamidoethyl phosphate己二酸二乙酯 AR,99.5%溴代異烷 CP
(2-Amiethyl)phosphinic acid4-基苯酸 97%2-溴代苯酮 96%
(2-Amiethyl)phosphonic acid1,3-酮二羧酸 97%三溴化磷 CP,98.0%
2-Bromo-1-(3-thienyl)-1-ethane3-氨基烷磺酸 97%酸 AR,≥99.5%
2-C-Methyl-D-erythro-1,4-lactone焦碳酸二乙酯 98%酸 CP,≥99.0%
2-(Dimethylami)ethanesulfonic acid鄰乙氧基苯甲酸 98%酸 GR,≥99.8%
2-Dimethylamiethylphosphonic acid2-吡啶乙酸鹽酸鹽 99%酸 PT
二苯胺磺酸鋇(98%)CD4 (D7D2Z) Rabbit mAbphospho-C CBL(Tyr674) 磷酸化原癌基因CBL2抗體
燦爛黃SUFU (C81H7) Rabbit mAbPhospho-BTK/BPK(Tyr223) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體
剛果紅(AR)Acetyl-Stat3 (Lys685) AntibodyPhospho-Btk(Ser180) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體
甲酚紅Acetyl-Stat3 (Lys685) AntibodyPhospho-BRCA1(Ser988) 磷酸化癌易感基因1抗體
鄰甲酚酞p53 (1C12) Mouse mAbPhospho-BRCA1(Ser1524) 磷酸化癌易感基因1抗體
鈣羧酸指示劑(AR)p53 (1C12) Mouse mAbPhospho-BRCA1(Ser1423) 磷酸化癌易感基因1抗體
鈣羧酸指示劑(Indicator)Acetyl-p53 (Lys382) AntibodyPhospho-BRCA1(Ser1189) 磷酸化癌易感基因1抗體
氯酚紅Acetyl-p53 (Lys382) Antibodyphospho-B-Raf (Thr597) 磷酸化B-Raf抗體
鈣鎂試劑Phospho-p53 (Ser33) Antibodyphospho-B-Raf (Thr401) 磷酸化B-Raf抗體
鄰甲酚酞絡合劑p53 (7F5) Rabbit mAbphospho-B-Raf (Ser602) 磷酸化B-Raf抗體
雞類圓線蟲PCR檢測試劑盒規格4-Fluoro-3-nitrobenzotrifluoride,99%通用試劑 5G
1-Iodo-4-nitrobenzene,98%通用試劑 5G
Hexylbenzene,≥99.8%通用試劑 1ML
4-Bromo-3-nitrotoluene,90%通用試劑 5G
1-Bromo-4-chloro-2-nitrobenzene,97%通用試劑 5G
Styrene oxide,97%通用試劑 25G
m-Terphenyl,99%通用試劑 25G
o-Terphenyl,99%通用試劑 25G
Cumene hydroperoxide,80%通用試劑 100ML
Pentacene,99%通用試劑 100MG
4-Methyl-3-nitrobenzonitrile,97%通用試劑 5G
1,3-Bis(trifluoromethyl)-5-bromobenzen...通用試劑 10G
[Bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene,97%通用試劑 5G
Hexamethylbenzene,99%通用試劑 1G
1,3,5-Tri-tert-butylbenzene,97%通用試劑 5G