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蘇丹埃博拉病毒PCR檢測試劑盒規格上海聯祖生物相關產品:人抗IVIgG抗體 檢測試劑盒酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。標準品(Standard):2瓶(凍干品)。樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
產品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 蘇丹埃博拉病毒PCR檢測試劑盒規格 |
英文名稱 | Sudan Ebola Virus RTPCR |
貨號 | LZP7356 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
D-Pinitol溴化銅 AR,99%液體石蠟 AR
D-(-)-Quinic acid溴化銅 99.95% metals basis山梨酸 AR,99%
D-(+)-Xylose氫氧化銅 CP,94%苯甲酸鈉 CP,99.0%
Epigoitrin無醋酸銅 AR.99.0%磺胺嘧啶銀 98%
Ergocalciferol無醋酸銅 99.99% metals basis磺胺胍 98%
Erythritol乙酸銅 一合物 99.95% metals basis磺胺嘧啶 分析標準品
Ethyl p-nitrobenzyl carbonate氧化亞銅 AR,95.0%磺胺嘧啶 98%
Eurycomalin A氧化亞銅 CP,90.0%甜蜜素 藥用級
Ezetimibe銅 AR,98.5 %亞硫酸氫鈉 CP
Ficaprel 11銅 99.9%無碳酸鈉 AR,≥99.8%
Fingolimod hydrochloride氯化銅,二 CP無碳酸鈉 GR,≥99.8%
Flavanthrin氯化銅,二 AR亞硝酸鈉 AR,99%
Fructose堿式碳酸銅 AR,54-57% Cu basis蔗糖 AR
Fumaric acid堿式碳酸銅 CP無亞硫酸鈉 anhydrous,CP.95.0%
Furan-2-carboxylic acid溴化鍶 99%焦亞硫酸鈉 ≥99%
Gambogenic acid茜素紅 AR,≥80.0%(HPLC)茶堿 藥典BP級
百里香酚酞Heregulin Antibodyphospho-ATF2(Ser44) 磷酸化活化復制因子2抗體
釷試劑Acetyl-Histone H2B (Lys5) Antibodyphospho-ATF2(Ser322) 磷酸化活化復制因子2抗體
鈦鐵試劑(AR)Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibodyphospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化復制因子2抗體
鈦鐵試劑(95%)Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibodyphospho-ATF2 (Thr53) 磷酸化活化復制因子2抗體
四溴酚酞乙酯鹽Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Antibodyphospho-ATF2 (Thr51) 磷酸化活化復制因子2抗體
金蓮橙OPhospho-Histone H2A.X (Ser139) Antibodyphospho-ATF2 (Ser490/498) 磷酸化活化復制因子2抗體
四羥基-對-苯醌二合物Histone H2A Antibody IIphospho-ASK1(Thr845) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
對二甲酚藍GIRK2 (D6C2T) Rabbit mAbphospho-ASK1(Ser967) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
鋅試劑(AR)Ribosomal Protein S3 Antibodyphospho-ASK1(Ser83) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
鋅試劑(≥85%(HPLC))MAGE-A3 Antibodyphospho-ASK1(Ser1033) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
蘇丹埃博拉病毒PCR檢測試劑盒規格Gallium oxide,≥99.99%多肽試劑 5G
Gallium metal,≥99.99%多肽試劑 10G
L(-)-Camphor,≥99.0%多肽試劑 5G
9,9-Dimethylfluorene ,≥99.0 %多肽試劑 5G
2-Nitrofluorene多肽試劑 5G
4,4'-(9-Fluorenylidene)diphel,≥98.0%多肽試劑 5G
2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobifluor...多肽試劑 1G
9,9-Dioctyl-2,7-dibromofluorene,≥97.0%多肽試劑 5G
2-Bromofluorene,≥97.0%多肽試劑 5G
9,9-Dimethyl-2,7-Dibromofluorene多肽試劑 5G
Dibenzofuran,≥98.0%多肽試劑 25G
2-Acetylfluorene,≥98.0%多肽試劑 5G
2-Amifluorene多肽試劑 1G
Fluorene, ≥99.5 % (HPLC)多肽試劑 1G
2,7-Dibromofluorene, ≥98.0%多肽試劑 1G