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丁型肝炎病毒PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:人c-fos檢測試劑盒精密度:ELISA試劑一般指其批內CV%,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍。
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 丁型肝炎病毒PCR檢測試劑盒價格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7561 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
Niobium(V) oxide4-溴吡啶鹽酸鹽 98%亞鈉 CP()
Tantalum3-溴苯胺 98%仲丁胺 99%
Tantalum4,4'-聯吡啶 98%N,N-二甲基乙胺 99%
Tantalum(V) oxideN,O-雙(*基硅烷基)三氟 96%異佛爾酮二胺 99%
Dysprosium(III)oxide3-丁炔-2- 97%乙酰乙酸基烯酸乙酯 95%
Erbium(III)oxide3-丁炔-1- 97%2,2-雙(羥甲基)酸 98%
Europium(III)oxide1,4-雙(*基硅烷基)-1,3-丁二炔 98%1,4-丁二 AR,98%
Gadolinium(III)oxide雙(三苯基膦)氯化鎳(Ⅱ) 98%1,3-丁二 99%
Lanthanum oxide雙(頻哪合)二 98%醋酸丁酸纖維素 30-35%
Neodymium trifluoride叔丁基二甲基硅烷基三氟磺酸酯 98%1,4-環己烷二甲(順+反異構體混合物) 99%
Neodymium oxide3-溴吡啶 98%一縮二 99%
Praseodymium(III) oxide苯并呋喃 99%二乙氨基乙 99%
Samarium oxide芐基氯甲基 60%N,N-二甲基乙酰胺 ≥99.8%
Scandium oxide3-溴-5-乙酰基吡啶 97%N,N-二甲基乙胺 CP,98.0%
Thulium oxide2-溴-5-硝基吡啶 98%正癸酸 CP,98%
Yttrium oxide3-溴-5-羥基吡啶 97%二甲基二甲氧基硅烷 97%
對茴香酸(>99.0%(GC)(T))Fyn AntibodyIntegrin alpha L/CD11a 整合素αL抗體
9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))Fyn AntibodyIntegrin alpha E2 整合素alpha E2 抗體
2-蒽甲酸(>98.0%(GC)(T))Desmin AntibodyIntegrin alpha E/CD103 整合素αE抗體
4-溴苯甲酸(>98.0%(GC)(T))Phospho-NF-κB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit mAb (Biotinylated)Integrin alpha 7/ITGA7 整合素α7抗體
4-溴苯甲酰氯(>98.0%(GC)(T))α-Parvin AntibodyIntegrin alpha 6 整合素α6抗體
4-氯苯甲酰氯(>98.0%(GC)(T))Phospho-AMPA Receptor 2 (GluA2) (Tyr876) AntibodyIntegrin alpha 5/CD49e/ITGA5 整合素α5抗體
4-基苯甲酸(>98.0%(GC)(T))Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (violetFluor™ 450 Conjugate)Integrin alpha 4+Beta 7 整合素α4β7抗體
4-基苯甲酰氯(>98.0%(GC)(T))Phospho-SATB1 (Ser47) AntibodyIntegrin alpha 4/CD49d 整合素α4抗體
4-二甲氨基苯甲酸(>98.0%(HPLC)(T))E2F4 (E3G2G) Rabbit mAbIntegrin alpha 3/CD49c 整合素α3抗體
5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))Phospho-SMC1 (Ser360) AntibodyIntegrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1抗體(Integrin α3β1)
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Bcl2相關抗凋亡基因6抗體Robtin中文名:別名:分子式:C15H12O6
組蛋白相關Bmi1抗體Anisofolin A中文名:別名:分子式:C39H32O14
溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標志物)3',4',7-Trimethoxyflavan中文名:別名:分子式:C18H20O4
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