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非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:CCSA-3檢測試劑盒接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒價格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7569 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
Locust bean gum雙(*基硅烷基)氨基鋰 95%硫酸標準溶液 0.05000mol/L(0.1N)
Acetanilide6-甲基-2-吡啶 98%硫代硫酸鈉標準溶液 0.1000mol/L
Saponin三氟磺酸汞 98%銀標準溶液 1000μg/ml
Octylamine2-甲氧基苯基酸 97%銀標準溶液 100μg/ml
Esculin sesquihydrateN-甲基-N-*基硅烷三 GC,≥98.5%硝酸銀標準溶液 0.1000mol/L(0.1N)
Myristoylcholine chlorideN-甲基-N-*基硅烷 95%硝酸銀標準溶液 0.01000mol/L(0.01N)
Butyric anhydride炔酸甲酯 97%鋅標準溶液 1000μg/ml
ACH4-甲基-3-硝基吡啶 97%鋅標準溶液 100μg/ml
1,6-Hexanediamine2-甲基-3-丁炔-2- 98%胞嘧啶核苷 99%
Magnesium3-甲氧基苯基酸 97%胞嘧啶核苷 用于細胞培養,≥99.0% (HPLC)
Magnesium4-甲氧基苯基酸 97%胞苷-5'磷酸 98%
Calcium iodateN-甲基-N-(*基硅基) 97%胞苷-5'磷酸 99%
Calcium peroxideN-甲氧基-N-(*基硅烷甲基)芐胺 96%2,2'-脫尿苷 99%
Titanium2-甲酰基-6-甲氧基吡啶 97%2’-脫氧尿苷 99%
Lilenic acid5-甲氧基-3-吡啶甲 97%5-甲基尿苷 99%
γ-Lilenic acid6-甲氧基-3-吡啶甲 97%5′-O-(4,4′-二甲氧基三苯甲基)胸苷 98.0%
雙(2,4-二基)草酸酯(>98.0%(T))Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)IL-28A/IFNL2 白細胞介素28A抗體
草酸雙[2,4,5-三氯-6-(戊氧羰基)苯基]酯(>98.0%(HPLC))Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjugate)IL-27R/TCCR 白細胞介素27受體抗體
8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二鈉鹽合物(>99.0%(HPLC)(T))Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb (Sepharose®Bead Conjugate)IL-26/AK155 白介素26抗體
8-苯胺-1-萘磺酸(>95.0%(HPLC)(T))Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (Biotinylated)IL-23R 白介素-23受體抗體
ANS-NH4(8-苯胺基-1-萘磺酸銨)(>95.0%(HPLC)(T))Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)IL-23 白介素-23抗體
ANS-Na(=8-苯胺基-1-萘磺酸鈉)(>97.0%(N))Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (Biotinylated)IL-22R 白介素-22受體抗體
ANS-Mg(=8-苯胺基-1-萘磺酸鎂)(>98.0%(HPLC)(T))NRF2 (D1Z9C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)IL-22BP/IL22RA2 白介素22受體結合蛋白抗體
102(>97.0%(HPLC)(N))Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Biotinylated)IL-22 白介素-22抗體
314(>98.0%(HPLC)(N))Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Biotinylated)IL-21R 白介素21受體抗體
氯化熒光素(>90.0%(HPLC))MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAbIL-21 白介素21抗體
非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒價格組蛋白去乙酰化酶4抗體Valtrate中文名:纈草素別名:分子式:C22H30O8
磷酸化組蛋白去乙酰化酶8抗體8,9-Didehydro-7-hydroxydolichodial中文名:別名:分子式:C10H12O3
組蛋白去乙酰化酶6抗體1-O-Methyljatamanin D中文名:別名:分子式:C11H16O4
磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體Splendoside中文名:別名:分子式:C17H26O11
組蛋白去乙酰化酶7抗體Euphroside中文名:別名:分子式:C16H24O10