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經甘丙肽樣肽GALP抗體Cryptaside A中文名:別名:Sarverogenin 3-O-oleandroside分子式:C30H42O10甘丙肽受體2抗體Timosaponin B-II中文名:知母皂苷B-II別名:Timosaponin BII; 知母皂苷BII分子式:C45H76O19甘丙肽受體3抗體Bufotalin中文名:蟾毒它
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 兔黏液瘤病毒PCR檢測試劑盒價格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7825 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
優級真空泵油(Viscosity Grade 46)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody II甲基噻吩-2-甲酸甲酯
優級真空泵油(Viscosity Grade 68)p14 ARF (4C6/4) Mouse mAb2--三氟甲基吡啶
優級真空泵油(Viscosity Grade 100)OGT (D1D8Q) Rabbit mAb1,二溴酮
優級真空泵油(Viscosity Grade 150)PA28α Antibody3,5-二-2-吡啶甲酸
紫尿酸 一水合物(97%)PA28β Antibody2-(2-氧基)磺酰
酚酸酯(標準品)Clathrin Heavy Chain (P1663) Antibody7-溴-羥基喹啉-甲酸
正戊酸(標準品)EEA1 Antibody(羥甲基)咪唑
酮中菌核利標準溶液(10μg/ml,u=2%)Phospho-IRF-7 (Ser437/438) (D6M2I) Rabbit mAb (Mouse Specific)2--5-三氟甲
效唑(分析標準品97.5%)PA28γ Antibody膦酰二
β-六六六標準溶液(100μg/ml,u=3%)Rab11a Antibody2-氟-5-溴
β-六六六標準溶液(100μg/ml,溶劑:甲)Rab11b Antibody2,二溴-5-甲基吡啶
β-六六六標準溶液(10μg/ml,u=6%)Ribosomal Proin L7a (E109) Antibody三
δ-六六六標準溶液(100μg/ml,溶劑:甲)Phospho-β-Arrestin 1 (Ser412) (6-24) Mouse mAb3,5-二甲酰
δ-六六六標準溶液(100μg/ml,u=3%)Phospho-PDGF Receptor α (Tyr762) (D9B1N) Rabbit mAb2,二甲酰
δ-六六六標準溶液(10μg/ml,u=6%)Lamin B2 (E1S1Q) Rabbit mAb (HRP Conjuga)溴磺酰
鹽酸標準溶液(0.1017mol/L)Notch2 (8A1) Rabbit mAb2-磺酰
2-羥基-5-硝基煙酸(98%)Notch4 (L5C5) Mouse mAb2-酚
正己烷(無水級, 95%)eIF4A (F52) Antibody噠
ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒Mast Cell Tryptase 肥大細胞蛋白酶7100 ul
I 型膠原蛋白(COL I)ELISA試劑盒TPSB2 肥大細胞類胰蛋白酶β2100 ul
H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)ELISA試劑盒MC-1R 黑皮質素-1受體20 ul
HSP60 IgMELISA試劑盒MCSF Receptor 巨噬細胞集落刺激因子受體100 ul
HSP60 IgGELISA試劑盒phosphoM-CSF Receptor(Tyr546) 酸化巨噬細胞集落刺激因子受體100 ul
HSP60 IgAELISA試劑盒phospho CSF1R (Tyr699) 酸化巨噬細胞集落刺激因子受體100 ul
H-ras ELISA試劑盒phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 酸化巨噬細胞集落刺激因子受體20 ul
HLAⅡ類組織相容性抗原,DPα1鏈(HLA-DPA1)ELSIA 試劑盒phospho-CSF1R (Tyr723) 酸化巨噬細胞集落刺激因子受體300 ul
HIV-1 TAT互動蛋白2(HTATIP2/TIP30)ELISA試劑盒phosphoM-CSF Receptor(Tyr809) 酸化巨噬細胞集落刺激因子受體100 ul
兔黏液瘤病毒PCR檢測試劑盒價格GDNF家族受體α3抗體 GFR α3Sarmentocymarin中文名:別名:Sarmentogenin 3-O-sarmentoside分子式:C30H46O8
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甘丙肽受體2抗體Timosaponin B-II中文名:知母皂苷B-II別名:Timosaponin BII; 知母皂苷BII分子式:C45H76O19
甘丙肽受體3抗體Bufotalin中文名:蟾毒它靈別名:分子式:C26H36O6
腦腸肽受體抗體Tenacissoside H中文名:通關藤苷H別名:分子式:C42H66O14