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免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司抗體僅用于科研現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
英文名稱 Anti-CK14+17+42+10
中文名稱 細胞角蛋白14抗體規格
別 名 Cytokeratin 14; CK 14; ck14; Cytokeratin14; Cytokeratin-14; Dowling Meara; ebs3; Epidermolysis bullosa simplex; k14; Keratin 14; Keratin type I cytoskeletal 14; Keratin14; Koebner; Krt 14; krt14; EBS3; EBS4; NFJ; Keratin, type I cytoskeletal 14; Cytokeratin 17; CK 17; ck17; Cytokeratin17; Cytokeratin-17; Keratin, type I cytoskeletal 17; Cytokeratin 10; CK 10; ck10; Cytokeratin10; Cytokeratin-10; Keratin, type I cytoskeletal 10; Cytokeratin 42; CK 42; ck42; Cytokeratin42; Cytokeratin-42; Keratin, type I cytoskeletal 42; K1C14_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK14(281-313aa/472aa)
亞 型 IgG
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
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豬葡萄糖氧化酶(GOD)酶聯免疫吸附測定試劑盒 瑞替加濱硫 GR,95-98%(劇品)鋅標準溶液 1000μg/ml
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豬半乳糖6硫酯酶(Gal-6S)酶聯免疫吸附測定試劑盒 植物凝膠硫標準溶液 0.5000mol/L(1N)鋅標準溶液 500mg/L,溶劑:1%鹽
豬淋巴素β受體(LTβR)酶聯免疫吸附測定試劑盒 磷氫二鈉,二水無水硫鈉 AR,99%鋅標準溶液100μg/ml,體:1%硝
豬褪黑素(MT)酶聯免疫吸附測定試劑盒瑞格列奈無水硫鈉 CP,98%鋅標準溶液 100μg/ml
豬過氧化物酶體生物合成因子2 (PEX2)酶聯免疫吸附測定試劑盒5-糠無水硫鈉 SP鋯標準溶液 1000μg/ml
豬血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)酶聯免疫吸附測定試劑盒 5-糠硫標準溶液 0.2500mol/L(0.5N)烯 CP,98.0%(劇品)
豬骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)酶聯免疫吸附測定試劑盒5-糠無水硫鈉 99.99% metals basis烯 AR,99.0% (劇品)
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豬葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)酶聯免疫吸附測定試劑盒 亞油酯無水硫鈉 ACS, ≥99.0%莰烯 分析標準品
豬優球蛋白(EL)酶聯免疫吸附測定試劑盒 亞油酯無水硫鈉 農殘級莰烯 75%
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