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犬惡絲蟲PCR檢測試劑盒說明書上海聯祖生物相關產品:IPO38檢測試劑盒 NAP1 (nucleosome assembly protein 1) 核小體組裝蛋白1(多肽)N-cadherin N-鈣粘附分子抗原
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產品名稱 | 犬惡絲蟲PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Dirofilaria immitisPCR |
貨號 | LZP6655 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)elisa試劑盒Anti-B4GALT1 Antibody研究領域 染色質和核信號 細胞周期蛋白
人干擾素調節因子8(IRF8)elisa試劑盒Anti-B4GALT3 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 信號轉導 激酶和磷酸酶
人八聚體轉錄因子(OTF2A)elisa試劑盒Anti-B4GALT5 Antibody研究領域 細胞凋亡
人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIG/CXCL9)elisa試劑盒Anti-BACH2 Antibody研究領域 腫瘤 信號轉導 細胞凋亡 細胞粘附分子 細胞分化
人Rho家族GTP酶1(RND1)elisa試劑盒Anti-BAG1 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞凋亡 細胞粘附分子 細胞分化
人Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)elisa試劑盒Anti-BAG4 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 細胞表面分子
人DNA損傷誘導轉錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)elisa試劑盒Anti-BAGE2 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 表觀遺傳學
人C多肽(CP)elisa試劑盒Anti-BAIAP2L1 Antibody研究領域 腫瘤 轉錄調節因子
人Alpha-D 生育酚/維生素E(Alpha-D TPL)elisa試劑盒Anti-BAGE3 Antibody研究領域 信號轉導 細胞粘附分子 細胞骨架
綿羊基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP9/Gelatinase B)elisa試劑盒Anti-BAGE4 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶
雞HSP90抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-BAIAP2L1 Antibody研究領域 細胞生物 細胞膜受體
雞HSP60抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-BAIAP2L1 Antibody研究領域 細胞生物 染色質和核信號 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶
大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)elisa試劑盒Anti-BAIAP2L2 Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導 細胞凋亡
大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)elisa試劑盒Anti-BAIAP2L2 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學 染色質和核信號 信號轉導 激酶和磷酸酶
大鼠Ras相關C3肉毒素底物1(RAC1)elisa試劑盒Anti-BAK1 Antibody研究領域 細胞生物 細胞凋亡
3-甲氧基-4-硝基苯酚 二苯基乙氧基膦 (五苯基)二苯基磷
鹽酸莫西沙星 (五苯基)二苯基磷 紅熒烯
N,O-1,3-二乙酰基吲哚 紅熒烯 4,4-雙(5-甲基-2-苯并唑基)二苯
3-溴苯 4,4-雙(5-甲基-2-苯并唑基)二苯 四溴對烯
3-Mercapto-1-hexal 3-巰基-1-己醇 51755-83-0
NICKEL(II) TE BASIC HYDRATE 堿式碳酸鎳 12607-70-4
Nickel(II) nitrate hexahydrate 鎳 13478-00-7
Nickel(II) acetate tetrahydrate 乙酸鎳 6018-89-9
大鼠載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒 ,英文名: APOC1 ELISA Kit
Mouse phosphotylisital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
MouseLeptin,LEPELISAkit 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanfibromodulin,FMODELISAKit人纖調蛋白規格:48T/96T
細胞/組織高質純化高爾基體分離試劑盒10次
ELISAKitMMP-5大鼠基質金屬蛋白酶5規格:48T/96T
犬惡絲蟲PCR檢測試劑盒說明書3-Bromo-4-hydroxybenzaldehyde,97%通用試劑 5G
2-Methoxycinnamaldehyde, predominantly...通用試劑 50G
α-Bromocinnamaldehyde,98%通用試劑 25G
trans-4-Nitrocinnamaldehyde,≥97.0%通用試劑 1G
5-Bromo-2-thiophenecarboxaldehyde,95%通用試劑 5G
2,4-Dimethylbenzaldehyde,≥90%通用試劑 25G
4-(Diethylami)salicylaldehyde,98%通用試劑 5G
4-Formylbenzonitrile,95%通用試劑 5G
3-Formylbenzonitrile,98%通用試劑 1G
Ferrocenecarboxaldehyde,98%通用試劑 1G
Bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxaldeh...通用試劑 5G
Pyridoxal 5′-phosphate hydrate,≥98%通用試劑 1G
3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde,98%通用試劑 1G
3-Bromobenzaldehyde,97%通用試劑 25G
4-Benzyloxybenzaldehyde,97%通用試劑 25G
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。