Product Center
長鼻分咽線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:LOC382344檢測試劑盒NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6(多肽)NIT2 (nitrilase family, member 2) NIT2蛋白抗原
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
?
產(chǎn)品名稱 | 長鼻分咽線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | Dispharynx nasutaPCR |
貨號 | LZP6656 |
實(shí)驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
大鼠P53(P53)elisa試劑盒Anti-BARD1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
大鼠Na-K-ATP酶elisa試劑盒Anti-BAZ2A Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞粘附分子
大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒Anti-BCAS3 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學(xué) G蛋白信號
大鼠3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)elisa試劑盒Anti-BCAP31 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶 內(nèi)分泌病
猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)elisa試劑盒Anti-BCL2L11 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 生長因子和激素 激酶和磷酸酶 細(xì)胞類型標(biāo)志物
倉鼠載脂蛋白B(APOB)elisa試劑盒Anti-BCAS4 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
海獅睪酮(T)elisa試劑盒Anti-BATF3 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
植物激素脫落酸(ABA)elisa試劑盒Anti-BCKDK Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
魚卵黃高磷蛋白(PV)elisa試劑盒Anti-BCL2L12 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體 內(nèi)分泌病
魚類促性腺激素釋放激素(GnRH)elisa試劑盒Anti-BCL6 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤
人外周血白細(xì)胞報價Anti-BCLAF1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶
人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-BCR Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞報價Anti-BDKRB1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 生長因子和激素 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體
大鼠前列腺上皮細(xì)胞價格Anti-BEND4 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶 Alzheimer's
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-BFAR Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 線粒體 細(xì)胞外基質(zhì) 泛素
1,4-二甲基二甲醚 1-氧化二苯基二氮烯 2,5-二甲氧基-β-硝基苯
苯并咪唑-5-甲酯 2,5-二甲氧基-β-硝基苯 四氫雙環(huán)戊二烯
2,6-二溴 四氫雙環(huán)戊二烯 六甲基乙烷
反式-1,4-環(huán)已烷二 叔丁基二甲硅烷基*磺酸酯 四(*基硅基)硅烷
Nickelous oxide 氧化鎳 1313-99-1
3-Methylthiopropal 3-甲硫基丙醇 505-10-2
4-BROMO-3-FLUOROANISOLE 4-溴-3-苯甲醚 458-50-4
2-Methyl-1-butanethiol 2-甲基丁硫醇 1878-18-8
大鼠載脂蛋白C2(APOC2)ELISA試劑盒 ,英文名: APOC2 ELISA Kit
Mouse phospho exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 小鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒
MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞/組織高粘性多聚賴氨酸載玻片制備試劑盒5次(50至100片)
ELISAKitMMP-7大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7規(guī)格:48T/96T
長鼻分咽線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-PL12-antibody,PL12/AlaRS ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-PL7-antibody ELISA Kit*
人Podocin ELISA試劑盒英文名稱:Human podocin ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人preptin ELISA試劑盒英文名稱:Human preptin ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒英文名稱:Human Placenta Cadherin,P-cad ELISA Kit*
大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒英文名稱:Rat islet cell antibody,ICA ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Amylin ELISA Kit*