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期基因BRLF1抗體2-Hydroxy-7-O-methylscillascillin中文名:別名:分子式:C18H14O7溴區結構域相鄰鋅指蛋白1A抗體5-Hydroxy-7-methoxy-3-(4-hydroxybenzylidene)chroman-4-one中文名:別名:分子式:C17H14O5巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 豬鏈球菌型(SS-)核酸試劑盒價格 |
規格 | 48T |
貨號 | LZP7981 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
三酚Phospho-STING (Ser366) (D8K6H) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)
1-萘酚PIAS3 Antibody硝基二酸二酯
鄰酚TRAF5 (D3E2R) Rabbit mAbDL-高半胱氨酸硫內酯鹽酸鹽
對酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb(S)-縮水甘油
對二酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb1,2,3,4,6-beta-D-葡萄糖五酸酯
愈創木酚p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)甲巰咪唑
萘酚ASEAAT1 Antibody2,6-二硝
α-萘酚醌烷GGA3 Antibody2,6-二硝基
2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二氨基)酚Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAbbeta-煙酰腺嘌呤二核苷二鈉
蒽酮(AR)Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb2--氟
硫代米氏酮TFIIB (2F6A3H4) Mouse mAb2-基酰酸酯
茚三酮,一水CHD2 Antibody5-甲氧基色
菲尼酮Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) Antibody溴-1--2-氟
單酸阿糖腺苷;阿糖腺苷單酸PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)3,二氟硫酚
α-萘黃酮MKK7 Antibody2,6-二羥
紫脲酸銨FXR1 Antibody2,二
1-萘TPA (12-O-tradecanoylphorbol-1Aceta)2,6-二溴酚
對二Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1-甲基-1,2,三唑
Apelin(APLN)ELISA試劑盒Ulex Europaeus Lectin 1/UEA1 荊豆凝集素1100 ul
apelin 13(AP13)ELISA試劑盒Urocortin 新型血管活性因子UCN100µg
apelin 12(AP12)ELISA試劑盒Urocortin 新型血管活性因子UCN100 ul
Agouti相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒Urocortin 3 尿皮質素UCN3100 ul
ADM2(ADM2)ELISA試劑盒galectin 9 半糖凝集素9500µl
8異F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試劑盒UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1100 ul
8異(8-iso-PG)ELISA試劑盒UCP-2 線粒體脫偶連蛋白2100 ul
8-異構F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒UCP-3 線粒體脫偶連蛋白3100 ul
8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒Uroglobin 珠蛋白100 ul
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巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體Isohemiphloin中文名:別名:8-Glucopyrasyl-4',5,7-trihydroxyflavane分子式:C21H22O10
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